بررسی تاثیر مهار پروتئین های شوک حرارتی در القاء آپوپتوز به واسطه نانوکورکومین پلیمری در رده ی سلولی سرطان معده

کورکومین یکی از ترکیبات زرد رنگ موجود در ریشه ی گیاه زردچوبه (curcuma longa) است که کاربردهای درمانی متعددی دارد. علی رغم این مطلب، متاسفانه زیست- دسترسی و حلالیت آن در محیط آبی محدود است و این امر یکی از محدودیت های استفاده از این دارو می باشد. یکی از روش های رفع این مشکل استفاده از نانوپلیمری بنام دندروزوم است. مطالعات مختلف حاکی از این است که ترکیب کورکومین- دندروزوم حلالیت بسیار بالایی دارد. بعلاوه این ترکیب در رده های سلولی سرطانی متعدد توانسته است که در غلظت های بسیار کمتری نسبت به کورکومین تنها، آپوپتوز ایجاد کند. کورکومین در سلول های سرطانی مختلف باعث تغییر الگوی بیان ژن های پروتئین های شوک حرارتی (hspها) می گردد. یکی از فرضیات در این مورد می تواند این باشد که تنش ناشی از کورکومین باعث بد تاخوردگی پروتئین ها می شود و سلول جهت مقاومت، بیان hsp های خود را افزایش می دهد. اما فرض دیگر می تواند این باشد که این تغییرات الگوی بیان hsp ها در راستای القای آپوپتوز ناشی از کورکومین انجام می گیرد. هدف مطالعه حاضر این هست که مشخص شود در رده ی سلولی سرطان معده (ags) در پاسخ به تیمار نانوکورکومین پلیمری، پروفایل بیان خانواده hspها چه تغییراتی متحمل می شود. سپس مشخص گردد که این تغییرات آیا در راستای القاء آپوپتوز است یا در جهت مقاومت سلولی. به این منظور در مطالعه حاضر ابتدا با استفاده از آزمون mtt، ic50 نانوکورمین پلیمری در زمان های24 ساعت،13 میکرومولار و 48 ساعت 12 میکرومولار تعیین شد. سپس رده سلول های سرطانی ags با غلظت 13 میکرومولار دارو در زمان 24 ساعت تیمار داده شد و تغییرات پروفایل بیان hsp ها را در مقایسه با رده سلولی کنترل)بدون تیمار( توسط روش real-time pcr بدست آمد و مشخص شد که در زمان 18 ساعت پس ازتیمار این تغییرات به حداکثر خود می رسد. به این طریق معلوم شد که hsp های hsp27، dnajb1، dnajc3، hsp90ab1 و hsp90b1 افزایش بیان معنی دار و hsp های hsp70a2 و dnajc15 کاهش بیان معنی داری نشان دادند. پس از مطالعه درباره ی نقش hsp های فوق مشخص شد که افزایش بیان hsp27 احتمالا نقش مقاومتی علیه القاء آپوپتوز دارد. جهت تایید این فرضیه، سلول با sirna های علیه hsp27 تیمار داده شدند تا بیان این hsp کاهش یابد. پس از تعیین زمان بندی جهت تیمار دارو و sirna به طور همزمان، رده ی سلولی ags با دارو و sirna تیمار داده شدند و میزان آپوپتوز با تست انکسین نسبت به کنترل که رده ی سلولی های ags فقط با دارو تیمار شده بود سنجیده شد و در نهایت مشخص گردید با کاستن از بیان hsp27 سلول ها نسبت به تیمار با نانوکورکومین پلیمری حساس تر می شوند و مرگ سلولی به میزان دو برابر افزایش می یابد (15/ 26 درصد و 61 / 52 درصد). بنابراین به نظر می رسد که رده سلول های سرطانی agsبیان hsp ها را جهت مقاومت در تیمار نانوکورکومین پلیمری افزایش می دهد. لذا پیشنهاد می گردد تا پس از انجام آزمون های تکمیلی، کاهش بیان hsp27 به عنوان استراتژی مکمل درمان سرطان معده به همراه نانوکورکومین پلیمری استفاده شود.